一、 前提:制备一张合格的染色涂片
在谈论区分之前,必须确保你的“观察对象”是清晰的。一张糟糕的涂片会让你的一切努力白费。
1、涂片薄而均匀:菌液量不宜过多,涂开后在玻片上形成一层极薄的膜,风干后再固定。过厚的涂片会导致细菌堆积重叠,无法分辨单个形态。
2、染色对比鲜明:最常用的是革兰氏染色。它不仅能将细菌分为G⁺(蓝紫色)和G⁻(红色),其结晶紫和沙黄(或番红)的对比色能极大增强细菌与背景的反差,使轮廓更清晰。确保染色步骤正确,冲洗干净,无染料沉淀。
3、油镜的使用:必须使用100倍油镜进行观察。低倍镜无法看清细菌的详细形态。
记住:成功的镜检始于成功的制片。
二、 核心区分要点:形态是唯一标准
抛开所有复杂的生化反应,最初的快速区分只依赖于一个最直观的特征:形状。
特征 | 球菌 | 杆菌 |
---|---|---|
核心形态 | 球状或近似球状 | 杆状或棒状 |
比喻 | 一堆乒乓球、玻璃珠 |
一根根短铅笔、小雪茄 |
形态变体 | 可能存在轻微的卵圆形、豆形 |
长短不一,有的短粗近似球杆状,有的细长 |
排列方式 | 极具特征性 (见下文详解) |
通常简单,多为单散、成对或链状 |
三、 实战四步鉴别法
请遵循以下流程,像侦探一样进行观察和推理。
不要试图分析视野中每一个颗粒。快速扫视整个视野,寻找那些分离良好、未被其他细胞重叠、染色清晰的单个细菌作为你的“典型目标”。重叠的菌团会干扰判断。
将注意力集中在一个“典型目标”上,仔细调节微调焦螺旋,确保其轮廓清晰。
自问:它是圆的吗?
如果看起来像一个完美的圆点,或者一个小圆饼,那么它极有可能是球菌。
如果看起来是 elongated(拉长的),即在一个方向上明显比另一个方向长,那么它一定是杆菌。
注意陷阱:有些短杆菌(如大肠杆菌在某些条件下)可能非常短粗,容易误认为球菌。此时进入第三步。
排列方式是帮助确认球菌的强力工具。杆菌很少形成复杂的排列。
如果怀疑是球菌,看它们如何聚会:
成对出现:两个球菌在一起——双球菌(如肺炎链球菌)。
链状排列:一串球菌像珍珠项链——链球菌。
葡萄串状:一堆球菌无规则聚集——葡萄球菌。
四联或八叠:四个成正方形或八个成立方体——四联球菌或八叠球菌。
看到以上任何一种特征性排列,即可基本断定是球菌。
对于杆菌:排列方式通常较简单,多为单散存在、成对(两个杆菌首尾相接)或链状(一长串杆菌,如枯草芽孢杆菌)。它们不会形成葡萄串状或四联状。
第四步:结合大小和背景进行综合判断
相对大小:一般而言,球菌的直径通常小于大多数杆菌的宽度。如果一个细菌看起来又“圆”又“胖”(比周围的球菌明显粗大),它很可能是一个短杆菌。
审视整个视野:不要只盯着一处。视野中绝大多数细菌的形态应该是一致的(纯培养情况下)。如果大部分细菌都是杆状,那么几个看起来像圆点的很可能是切面较短的杆菌,应以主流形态为准。
四、 常见误区与高级技巧
误区一:把杂质或染料沉淀当细菌。细菌有非常均匀的着色和规则的形态。杂质往往形状不规则、边缘模糊、着色不均。多观察,积累经验即可轻松区分。
误区二:过度依赖排列方式。某些杆菌(如棒状杆菌)会呈“八字”或栅栏状排列,不要因此误认为是球菌的复杂排列。始终回归到单个细胞的形态这一根本上来。
高级技巧:利用焦距变化。轻轻上下调节微调焦螺旋,观察细菌的形态变化。球菌在各个焦面上看起来都是圆的,而杆菌在焦距变化时,其“杆”的特征会更加明显。
总结
熟练之后,这个过程几乎成为一种条件反射。一眼望去,大脑就能自动完成形状识别和分类。这份能力的背后,是无数次制片、观察和经验积累。现在,就拿起你的标本,从一枚清晰的革兰氏染色涂片开始实践吧!
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2025-06-24
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谈及2024年安捷伦大中华区的业绩表现,杨挺表示,尽管在2023年和2024年全球经济增速放缓,安捷伦中国的业绩仍稳步增长,尤其在制药、食品、环境等行业展现出强劲的市场需求。未来,随着中国科技创新和绿色发展政策的持续推进,安捷伦将继续深化在中国的布局,进一步推动本土化创新。 总结 2024年安捷伦媒体沟通会不仅展示了安捷伦在液相色谱领域的创新成果,也体现了公司在中国市场的深耕与战略部署。
作者:张明
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