【揭秘】P3实验室之核酸检测

赵敏 0 2021-01-22

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P3实验室核酸检测

随着新冠疫情进入“常态”，每天全国都有上万份新冠肺炎核酸样本等待被检测。P3实验室作为“手撕病毒”的重要阵地，究竟是什么样子呢？病毒在P3实验室是怎样被“揪出来”的？下面就跟小析姐一同揭开该院P3实验室的神秘面纱，以及核酸的检测流程。

实验室是进行科研工作的必需场所，根据危险度等级，包括传染病原的传染性和危害性，国际上将生物实验室按照生物安全水平英文是Biosafety level，简称BSL，分为P1、P2、P3和P4四个等级。

P1-P4实验室可以承担的工作也根据安全等级进行划分，其严格等级从低到高。

P1实验室又称基础实验室，适合对人体、动植物或环境危害较低，不具有对健康成人，动植物致病的因子。

P2实验室又称基础实验室，适用于对人体、动植物或环境具有中等危害或具有潜在危险的致病因子，对健康成人、动物和环境不会造成严重危害，有有效的预防和治疗措施。

P3实验室又称防护实验室，适用于处理对人体、动植物或环境具有高度危害性，通过直接接触或气溶胶使人传染上严重甚至是致命的疾病，或对动植物和环境具有高度危害的致病因子，通常有预防和治疗措施。

P4实验室是最高级别防护实验室，适用于对人体、动植物或环境具有高度危害性，通过气溶胶途径传播或传播途径不明，或未知的、高度危险的致病因子。没有预防和治疗措施。比如埃博拉病毒、HIV。

那么，核酸检测在P3实验室是如何进行的呢？

核酸检测是确诊新冠肺炎的“金标准”，而检测流程中的每一个环节都是精细活，容不得半点马虎。实验室内的检测流程可分为5个步骤：检测前的准备工作——核对样本信息——样本灭活——开盖加样和核酸提取——PCR反应体系配制——核酸扩增检测——检测完成——高压灭菌。

第一步，检测前的准备工作

打开样本前，必须做好全方位的防护。在实验室的洁净室，汪博士穿上 隔离衣、防护服、防护口罩、护目镜、面屏、双层医用乳胶手套、防水靴套，每个步骤都不能有错。

第二步，核对样本信息

进入实验室核心区后，先用75%酒精对送样箱进行外表面消毒，消毒完毕后核对被检样本姓名、性别、年龄、编号等信息。

第三步，样本灭活

样本将在水浴箱经半小时56℃高温灭活，使病毒蛋白不再有生理活性，失去感染、致病和繁殖能力。这会让检测时相对安全，但病毒蛋白的基因序列并没有受到影响。

第四步，开盖加样和核酸提取

检测的核心环节，实验员拿到灭活后的样本时，第一个动作就是振荡，尽量让拭子上的病毒洗脱在培养基溶液中，再静置5分钟沉淀。接下来是开盖加样，必须人工操作，且需要两个人高度配合才能完成。一人拧开样本罐盖子，另一人拿着微量移液器在样本罐中吸取微量溶液，放到另一个提取管里，再拧上管盖。

酸提取可以使用仪器辅助，但由于比对需要，往往要加以人工操作，需要反复进行离心、加试剂、洗涤等10多个步骤。其中，需要打开管盖的操作就达7次以上，完成一例人工核酸提取要50分钟左右。

第五步，PCR反应体系配制

走出核心实验区，开始进行PCR反应体系配制，将提取的病毒核酸加入到核酸扩增检测试剂中。

第六步，核酸扩增检测

将配制好的PCR反应物放置在荧光定量PCR仪上。在电脑上设置PCR反应条件，运行仪器，开始核酸扩增检测。

第七步，检测完成

实时关注检测情况，大约1.5小时后，核酸扩增完成，进行检测结果判读。至此，该样本的新型冠状病毒核酸检测就算完成了，整个流程大概4小时。

还有最后一步，也是非常重要的一步，污染物的高压灭菌处理。实验过程产生的污染物通过高压灭菌后，按普通医疗垃圾处理。

（内容来源：网络由小析姐整理编辑）

责任编辑：展源

审　　核：何发