99% 的人不知道的 PCR 耗材小机密！

展源 0 2023-05-18

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要想成为真正的PCR达人，并非易事。一个小小的环节都可能让整个实验挂掉，也正是因此，PCR成为了资深科研者们心中的痛。不要说实验本身，其实就连实验的耗材都隐藏着大学问，工欲善其事，必先利其器。今天我们就具体来说下PCR耗材中选择选择反应板的问题。

PCR板通常采用96孔和384孔的形式，其次为24孔和48孔。使用的PCR仪和正在进行的应用的性质将决定PCR板是否适合您的实验。

裙边

PCR板的“裙”是板周围的板。裙边可为反应体系构建时的移液过程提供较好的稳定性，以及在进行自动机械处理时提供更好的机械强度。PCR平板可分为无裙边，半裙边和全裙边。

无裙边板缺少周围的面板（图 A）。这种形式的反应板可与绝大多数PCR 仪和实时PCR仪的模块适配，但不适用于自动化应用。

半裙边板在板的边缘周围具有短的边缘（图 B），在移液过程中提供足够的支撑。

全裙边的PCR板具有覆盖板高度的边缘面板（图 C）。这种板形式适用于具有突出模块的PCR仪（可有利于自动化操作），可安全稳固适配。全裙边还增强了机械强度，使其非常适合在自动化工作流程中使用机器人平台。

板面

板的板面是指其上表面。全平面板设计适用大多数PCR仪，便于密封和处理。

边缘凸起板设计对于某些PCR仪器具有最佳适配性，有助于在不需要适配器的情况下平衡热盖压力，确保最佳的的热传递和可靠的实验结果。

具有全平面板和凸起边缘的 PCR 板

颜色

PCR板通常可提供多种不同的颜色形式，以便于对于样品的视觉区分和鉴别，特别是在高通量实验中。尽管塑料的颜色对DNA扩增没有影响，但在设置实时荧光定量PCR的反应时，与透明耗材相比，我们更推荐使用白色塑料耗材或者经磨砂处理的塑料耗材，以实现灵敏和准确的荧光检测。

qPCR使用透明和白色耗材的结果比较（A）与透明孔相比，白色孔Ct值更低（灵敏度更高）。（B）白色孔在技术重复中也表现出更高的一致性。

白色耗材通过阻止荧光折射出管来提高qPCR数据的灵敏度和一致性。折射被最小化时，更多的信号被反射回检测器，从而增加信噪比。此外，白色管壁可阻止荧光信号传递至PCR仪模块，避免被吸收或不一致地反射荧光信号，从而使重复实验中的差异降至最低。

不同品牌仪器，由于荧光检测器位置设计不同，请参考生产厂家推荐的耗材。通常AppliedBiosystemsPCR仪，我们推荐您使用原装的磨砂孔PCR 板，这些耗材经过研发严格测试，可确保您获得准确可靠的实验数据。而对于Bio-RadCFX或Roche480 荧光定量PCR仪，厂家推荐使用白色PCR 板。

外形

PCR板的外形是指其高度，因此“low profile（低容，低位）”意味着高度更低。低容耗材更短的设计最大程度减少了反应体系上方的空间，降低了蒸发的影响并提高了热传导效率。因此，同时兼容的情况下推荐优先选择低容耗材，即“快速”板或矮板。