【妙招】4个固相萃取柱常见问题这样搞定

展源 2025-01-14

关于萃取柱使用时的常见问题，一般有回收率低、重现性差、净化效果不佳、流速过快过慢这几大方面，下面我们一一说明。

回收率低

1、目标物在填料上保留不足

判断方法：空白溶剂加标，回收上样液和淋洗液，若实际检测浓度超过含量的5%，说明保留不足。

可能原因	对策
SPE柱选择不合适	选择更强保留的SPE柱
样品上样液或淋洗液的洗脱强度过强	降低样品上样液或者淋洗液的洗脱强度
上样体积/浓度过高，导致过载发生	减少上样浓度或者增加填料量
操作过程中，小柱发生“干涸”现象	重新进行活化/平衡，保证小柱在淋洗结束前不能发生“干涸”现象

2、目标洗脱不完全

判断方法：空白溶剂加标，回收上样液和淋洗液，没有检出目标物；但回收洗脱液，回收率也不高。

3、其他原因

判断方法：空白溶剂加标，回收上样液，淋洗液没有检出目标物；回收洗脱液，回收率正常。

可能原因	对策
预处理的提取不足	改变提取溶剂
目标物质不稳定，挥发或者分解	改变提取和转移方式，减少加热温度，受PH影响较大的化合物可加入缓冲盐调节PH等
预处理过程复杂	简化预处理过程
目标物与杂质结合	换适当的方法除杂质
杂质干扰效应太强	改变前处理方法或与基质加标物质进行对比
杂质过多，超出小柱最高保留	改变预处理方法，减少上样量或增加小柱填料量

重复性差

净化效果不佳

对策

① 改变预处理方法

② 改变淋洗液和洗脱液的强度

③ 选择合适的作用小柱

④ 正确进行SPE操作

流速过慢

可能原因	对策
SPE选择的粒径过小	选择大粒径SPE
样品预处理后仍有悬浮不溶物	上样前冷冻离心
样品粘度太高	样品稀释
SPE阻力过大，液体无法靠重力滴落	使用手动固相萃取柱装置，通过调节止回阀，气门，抽负压来调节流速
流速过快的原因	对策
SPE选择的粒径过大	选择小粒径的SPE
重力作用时流速依然很快	使用手动SPE装置，调节止回阀
抽负压时流速过快	调节止回阀和气门，控制真空表压力恒定在一定范围内