LC-MS/MS方法定量分析PFOA

LC-MS/MS定量分析PFOA

0 2020-05-27

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PFOA的校准曲线。采用LC-MS/MS方法分析全氟辛酸（PFOA），色谱柱为反相C18（2.1mm×100mm），填料粒径1.8μm；流动相为含乙酸铵的水与甲醇的混合物，流速0.3ml/min,等度洗脱。上述条件下PFOA的保留时间是2.3min，线性范围9fg/μl~150pg/μl，在浓度为9fg/μl时，峰面积重现性为5.5%（RSD），信噪比（S/N）为7.

图1. PFOA的校准曲线。

采用LC-MS/MS方法分析全氟辛酸（PFOA），色谱柱为反相C18（2.1mm×100mm），填料粒径1.8 μm；流动相为含乙酸铵的水与甲醇的混合物，流速0.3ml/min,等度洗脱。上述条件下PFOA的保留时间是2.3 min，线性范围 9 fg/μl~150 pg/μl，在浓度为9 fg/μl时，峰面积重现性为5.5%（RSD），信噪比（S/N）为7.2。

全氟辛酸（PFOA）是合成化合物，在自然环境中是不会产生的。PFOA 的结构为CF3-（CF2）6- COOH，是合成全氟聚合物的常用原料，而全氟聚合物在防火、抗油、抗污渍方面性能优异。毒理学研究证明，PFOA暴露能够引起持续的毒性，导致肝脏损伤，甚至癌症。PFOA在环境中可以持久存在，在美国的环境和普通人群的血液中曾检测出很低浓度的PFOA。最近，美国环保署的研究说明，需要加强对该物质的检测。欧盟的法规要求监测饮用水中< 100 ppt的PFOA。

这是一种羧酸，用电喷雾（ESI）质谱分析时，采用负离模式应该灵敏度更高。本文用液相色谱-质谱联用（LC-MS/MS）技术分析了PFOA标准品的稀释溶液，浓度为9fg/μl到150pg/μl，线性相关系数R2> 0.997。采用9 fg/μl的溶液连续进样6次以测试i重现性，相对标准偏差（RSD）为5.5%。因为进样体积是10μl，故柱上进样量只有90fg。

图2. 在最低浓度下有优异的灵敏度和重现性。

实验部分

样品制备

PFOA标准样品的浓度为1.5μ μg/μl，用甲醇逐级稀释到0.009、0.015、0.15、0.45、0.75、1.5、15.0、150 pg/μl。

LC/MS 方法条件

LC条件：Agilent 1100 系列二元泵、脱气机、孔板进样器和色谱柱恒温箱；色谱柱为Agilent ZORBAX Eclipse Plus RRHT C18，2.1 mm × 100 mm，1.8 μm （部件号959764-902），柱温40 ℃；流动相：15%的10mM乙酸铵水溶液，85%的10 mM 乙酸铵的甲醇/水（80:20）溶液，流速 0.3 ml/min；进样量10 μl，停止时间3 m；注射针清洗为75:25甲醇/水；清洗进样口10s。

MS 条件：模式为负模式ESI，使用Agilent G1948B离子源；雾化器 35 psig，干燥气流速 10 L/min、温度 300℃；Vcap为4000 V，分辨率（FWHM）为 Q1 = 0.7 amu，Q2 = 0.7amu；MRM transition，m/z 413.0>369.0，碎裂器电压 67 V，碰撞能量3 V，Dwell 时间200 ms。

图3. 加入1500 pg/μl的样品（柱上15 ng）后达到饱和。

结果与讨论

图1是PFOA的校准曲线。最低浓度（9 fg/μl）的样品重复进样9次，15 fg/μl的样品也重复进样9次，9 fg/μl和15fg/μl浓度的点为9次进样的平均值，150 fg/μl浓度的样品为一次进样的结果。

如图2所示，9 fg/μl浓度样品9次进样，柱上样品量90fg。峰面积的重现性为5.5%（RSD）。平均信噪比（S/N）为7.2，噪音计算范围是 1~1.5 min。可见，线性（9fg/μl~150 pg/μl）和重复性良好，R2 > 0.997。

如果将浓度为1500 pg/μl的样品进入到校准曲线，结果如图3所示。此时需要二次曲线拟合，不过，相关系数相当好（R2>0.99999）。

结论

电喷雾负离子模式检测PFOA有很高的灵敏度。在9 fg/ul到150 pg/μl的浓度范围内线性关系良好，相对应的柱上样品量为90 fg到1.5 ng。低浓度（9 fg/μl）时的峰面积重现性为5.5% RSD，重复进样的平均信噪比为7.2。信号饱和的浓度为1500 pg/μl，即柱上样品量15 ng。由于饮用水的基质一般较为干净，故可以预测，用该方法分析饮用水的萃取物也可以达到类似的灵敏度。

责任编辑：展源

审　　核：何发