Bernward Rittgerodt,具有40年液相色谱工作经验,并曾任职德国Knauer公司负责人。目前他创建了Brimus公司,并在色谱技术中心担当技术代表。
现象:尽管我操作很仔细认真,但还是得不到稳定基线或根本没有信号。
问题:如何顺利地进行分析? 问题出在哪儿?
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首先需要确定的是,高压泵是否有压力;如果没问题应当检查一下高压泵是否输出所希望的流速;如果正确就要仔细检查高压泵出口和分离柱之间是否有泄漏,即连接是否正确或连接是否松开。
最常见的情况是高压泵头中有空气泡,在高压泵正常工作状态下不能有效排出。空气泡被反复压缩与膨胀,却不能推出流动相。这种情况通常可以通过打开泄压阀,并设置成尽可能高的流速就可解决。因为此时系统被泄压,高流速的流动相可以将高压泵头中的空气泡冲洗出。如果还不行,可以在泄压阀的出口用针管吸来排出空气泡。
空气泡排出后必须首先将流速调到正常范围内再关闭泄压阀。如果高压泵没有泄压阀,就必须松开高压泵流动相出口和进样系统之间的连接来泄压。
通常压力的波动会导致让人难以接受的组分保留时间的波动,解决这种现象可采取和上述相似的办法:泄压后用高流速或针管吸排出小气泡。可能的话检查一下脱气系统工作是否正常。出现这样的问题经常也有可能是高压泵的球阀工作不正常,球阀的作用是将流动相导向希望的方向,若球阀工作不正常,将会出现小体积的流动相回流。这种情况通常是因为球阀内有小颗粒物或球阀粘连,建议将球阀拆开进行超声波清洗。有些情况当然也可能是球阀机械损伤(通常可以在显微镜下看到),这时就只能建议更换球阀。
结论
可能由于高压泵的原因产生的不稳定基线,应当检查系统是否泄漏,高压泵头是否有空气泡,以及球阀工作是否正常。
《实验与分析》
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何发
2020-05-27
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