几种常用溶液浓度的表示法

　　(1)质量百分比浓度：用溶质的质量占全部溶液质量的百分比来表示的浓度。简称百分浓度。

　　(2)体积百分比浓度：用溶质的质量占溶剂体积的百分比来表示的浓度。在工农业生产中常用这种浓度。

　　(3)体积比浓度：液体试剂相互混和或液体试剂用水稀释时常用此法。例如，1∶3酒精溶液指的是1体积的酒精和3体积的蒸馏水混和而成的酒精水溶液，1∶3中的前一个数字指的是溶质的体积数，后一个数字指的是溶剂的体积数。

　　(4)物质的量浓度：用1升溶液里含有溶质的量来表示的溶液浓度。目前习惯称摩尔浓度，用M表示。

　　(5)当量浓度：用每升溶液里所含溶质的克当量数表示的浓度。通常用N表示。

　　常用酸、碱、盐溶液的配制

　　1.酸溶液

　　2.碱溶液

　　3.盐溶液

　　常用溶液配制方法

　　1.30%丙烯酰胺溶液

　　【配制方法】将29g丙烯酰胺和1g N，N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的水中。加热至37℃溶解之，补加水至终体积为100ml。用Nalgene滤器(0.45μm孔径)过滤除菌，查证该溶液的pH值应不大于7.0，置棕色瓶中保存于室温。

　　【注意】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收，其作用具累积性。称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。可认为聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为它还可能会含有少量未聚合材料。一些价格较低的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子，在丙烯酰胺贮存液中加入大约0.2体积的单床混合树脂(MB-1Mallinckrodt)，搅拌过夜，然后用Whatman 1号滤纸过滤以纯化之。在贮存期间，丙烯酰胺和双丙烯酰胺会缓慢转化成丙烯酰和双丙烯酸。

　　2.40%丙烯酰胺

　　【配制方法】把380g丙烯酰胺(DNA测序级)和20g N，N’-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为600ml的蒸馏水中。继续按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法处理，但加热溶解后应以蒸馏水补足至终体积为1L。

　　【注意】见上述配制30%丙烯酰胺的说明，40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列测定。

　　3.放线菌素D溶液

　　【配制方法】把20mg放线菌素D溶解于4ml 100%乙醇中，1：10稀释贮存液，用100%乙醇作空白对照读取OD440值。放线菌素D(分子量为1255)纯品在水溶液中的摩尔消化系数为21，900，故而1mg/ml的放线菌素D溶液在440nm处的吸光值为0.182，放线菌素D的贮存液应放在包有箔片的试管中，保存于-20℃。

　　【注意】放线菌素D是致畸剂和致癌剂，配制该溶液时必须戴手套并在通风橱内操作，而不能在开放在实验桌面上进行，谨防吸入药粉或让其接触到眼睛或皮肤。

　　药厂提供的作治疗用途的放线菌素D制品常含有糖或盐等添加剂。只要通过测量贮存液在440nm波长处的光吸收确定放线菌素D的浓度，这类制品便可用于抑制自身引导作用。

　　4.0.1mol/L腺苷三磷酸(ATP)溶液

　　【配制方法】在0.8ml水中溶解60mg ATP,用0.1mol/L NaOH调至pH值至7.0，用蒸馏水定容1ml，分装成小份保存于-70℃

　　5.10mol/L乙酸酰溶液

　　【配制方法】把770g乙酸酰溶解于800ml水中，加水定容至1L后过滤除菌。

　　6.10%过硫酸铵溶液

　　【配制方法】把1g过硫酸铵溶解于终量为10ml的水溶液中，该溶液可在4℃保存数周。

　　7.BCIP溶液

　　【配制方法】把0.5g的5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸二钠盐(BCIP)溶解于10ml 100%的二甲基甲酰胺中，保存于4℃

　　8.2×BES缓冲盐溶液

　　【配制方法】用总体积90ml的蒸馏水溶解1.07g盐溶液BES、1.6g NaCl和0.027g Na2HPO4，室温下用HCl调节　该溶液的pH值至6.96、然后加入蒸馏水定容至100ml，用0.22μm滤器过滤除菌，分装成小份，保存于-20℃。

　　9.1mol/L CaCl₂溶液

　　【配制方法】在200ml蒸馏水中溶解54g CaCl₂?6H₂O，用0.22μm滤器过滤除菌，分装成10ml小份贮存于-20℃。

　　【注意】制备感受态细胞时，取出一小份解冻并用蒸馏水稀释至100ml，用Nalgene滤器(0.45μm孔径)过滤除菌，然后骤冷至0℃。

　　10.2.5mol/L CaCl₂溶液

　　【配制方法】在20ml蒸馏水中溶解13.5g CaCl₂?6H₂O，用0.22μm滤器过滤除菌，分装成1ml小份贮存于-20℃。

　　11.1mol/L二硫苏糖醇(DTT)溶液

　　【配制方法】用20ml 0.01mol/L乙酸钠溶液(pH5.2)溶解3.09g DTT，过滤除菌后分装成1ml小份贮存于-20℃。

　　【注意】DTT或含有DTT的溶液不能进行高压处理。

　　12.脱氧核苷三磷酸(dNTP)溶液

　　【配制方法】把每一种dNTP溶解于水至浓度各为100mmol/L左右，用微量移液器吸取0.05mol/l Tris碱分别调节　每一dNTP溶液的pH值7.0(用pH试纸检测)，把中和后的每种dNTP溶液各取一份作适当稀释，在给出的波长下读取光密度计算出每种dNTP的实际浓度，然后用水稀释成终浓度为50mmol/L的dNTP，分装成小份贮存于-70℃。

　　13.0.5mol/l EDTA(pH8.0)溶液

　　【配制方法】在800ml水中加入186.1g二水乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na?2H₂O)，在磁力搅拌器上剧烈搅拌，用NaOH调节　溶液的pH值至8.0(约需20g NaOH颗粒)然后定容至1L，分装后高压灭菌备用。

　　【注意】EDTA二钠盐需加入NaOH将溶液的pH值调至接近8.0，才能完全溶解。

　　14.溴化乙锭(10mg/ml溶液)

　　【配制方法】在100ml水中加入1g溴化乙锭，磁力搅拌数小时以确保其完全溶解，然后用铝箔包裹容器或转移至棕色瓶中，保存于室温。

　　【注意】小心：溴化乙锭是强诱变剂并有中度毒性，使用含有这种染料的溶液时务必戴上手套，称量染料时要戴面罩。

　　15.2×HEPES缓冲盐溶液

　　【配制方法】用总量为90ml的蒸馏水溶解1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na₂PO₄?2H₂O、0.2g葡聚糖和1gHEPES，用0.5mol/l NaOH调节　pH值至7.05，再用蒸馏水定容至100ml。用0.22μm滤器过滤除菌，分装成5ml小份，贮存于-20℃。

　　16.IPTG溶液

　　【配制方法】IPTG为异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(分子量为238.3)，在8ml蒸馏水中溶解2g IPTG后，用蒸馏水定容至10ml，用0.22μm滤器过滤除菌，分装成1ml小份贮存于-20℃。

　　17.1mol/L乙酸镁溶液

　　【配制方法】在800ml水中溶解214.46g四水乙酸镁，用水定容至1L过滤除菌。

　　18.1mol/L MgCl₂溶液

　　【配制方法】在800ml水中溶解203.4g MgCl₂?6H₂O，用水定容至1L，分装成小份并高压灭菌备用。

　　【注意】MgCl₂极易潮解，应选购小瓶(如100g)试剂，启用新瓶后勿长期存放。

　　19.β-巯基乙醇(BME)溶液

　　【配制方法】一般得到的是14.4mol/L溶液，应装在棕色瓶中保存于4℃。

　　【注意】BME或含有BME的溶液不能高压处理。

　　20.NBT溶液

　　【配制方法】把0.5g氯化氮蓝四唑溶解于10ml 70%的二甲基甲酰胺中，保存于4℃。

　　21.酚/氯仿溶液

　　【配制方法】把酚和氯仿等体积混合后用0.1mol/L Tris?HCl(pH7.6)抽提几次以平衡这一混合物，置棕色玻璃瓶中，上面覆盖等体积的0.01mol/l Tris?HCl(pH7.6)液层，保存于4℃。

　　【注意】酚腐蚀性很强，并可引起严重灼伤，操作时应戴手套及防护镜，穿防护服。所有操作均应在化学通风橱中进行。与酚接触过的部位皮肤应用大量的水清洗，并用肥皂和水洗涤，忌用乙醇。

　　22.10mmol/L苯甲基磺酰氟(PMSF)溶液

　　【配制方法】用异丙醇溶解PMSF成1.74mg/ml(10mmol/L)，分装成小份贮存于-20℃。如有必要可配成浓度高达17.4mg/ml的贮存液(100mmol/L)。

　　【注意】PMSF严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤，吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。一旦眼睛或皮肤接触了PMSF，应立即用大量水冲洗之。凡被PMSF污染的衣物应予丢弃。PMSF在水溶液中不稳定。应在使用前从贮存液中现用现加于裂解缓冲液中。PMSF在水溶液中的活性丧失速率随pH值的升高而加快，且25℃的失活速率高于4℃。pH值为8.0时，20μmmol/l PMSF水溶液的半寿期大约为85min，这表明将PMSF溶液调节　为碱性(pH>8.6)并在室温放置数小时后，可安全地予以丢弃。

　　23.磷酸盐缓冲溶液(PBS)溶液

　　【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,用HCl调节　溶液的pH值至7.4加水定容至1L，在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌20min。保存于室温。

　　24.1mol/L乙酸钾(pH7.5)溶液

　　【配制方法】将9.82g乙酸钾溶解于90ml纯水中，用2mol/L乙酸调节　pH值至7.5后加入纯水定容到1L，保存于-20℃。

　　25.乙酸钾溶液(用于碱裂解)

　　【配制方法】在60ml 5mol/L乙酸钾溶液中加入11.5ml冰乙酸和28.5ml水，即成钾浓度为3mol/L而乙酸根浓度为5mol/L的溶液。

　　26.3mol/L乙酸钠(pH5.2和pH7.0)溶液

　　【配制方法】在80ml水中溶解408.1g三水乙酸钠，用冰乙酸调节　pH值至5.2或用稀乙酸调节　pH值至7.0，加水定容到1L，分装后高压灭菌。

　　27.5mol/L NaCl溶液

　　【配制方法】在800ml水中溶解292.2g NaCl加水定容至1L，分装后高压灭菌。

　　28.10%十二烷基硫酸钠(SDS)溶液

　　【配制方法】在900ml水中溶解100g电泳级SDS，加热至68℃助溶，加入几滴浓盐酸调节　溶液的pH值至7.2，加水定容至1L，分装备用。

　　【注意】SDS的微细晶粒易扩散，因此称量时要戴面罩，称量完毕后要清除残留在称量工作区和天平上的SDS，10%SDS溶液无须灭菌。

　　29.20×SSC溶液

　　【配制方法】在800ml水中溶解175.3g NaCl和88.2g柠檬酸钠，加入数滴10mol/l NaOH溶液调节　pH值至7.0，加水定容至1L，分装后高压灭菌。

　　30.20×SSPE溶液

　　【配制方法】在800ml水中溶解17.5g NaCl、27.6g NaH2PO4?H2O和7.4g EDTA，用NaOH溶液调节　pH值至7.4(约需6.5ml 10ml/L NaOH)，加水定容至1L，分装后高压灭菌。

　　31.100%三氯乙酸溶液

　　【配制方法】在装有500g TCA的瓶中加入227ml水，形成的溶液含有100%(M/V)TCA。

　　32.1mol/L Tris溶液

　　【配制方法】在800ml水中溶解121.91g Tris碱，加入浓HCl调节　pH值至所需值。应使溶液冷至室温后方可最后调定pH值，加水定容至1L，分装后高压灭菌。

　　【注意】如1mol/L溶液呈现黄色，应予丢弃并置备质量更好的Tris。

　　尽管多种类型的电极均不能准确测量Tris溶液的pH值，但仍可向大多数厂商购得合适的电极。Tris溶液的pH值因温度而异，温度每升高1℃，pH值大约降低0.03个单位。例如：0.05mol/L的溶液在5℃、25℃、和37℃时的pH值分别为9.5、8.9和8.6。

　　33.Tris缓冲盐溶液(TBS)(25mmol/l Tris)

　　【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解8g NaCl、0.2g KCl和3g Tris碱，加入0.015g酚并用HCl调至pH值至7.4，用蒸馏水定容至1L，分装后在151bf/in2(1.034×105Pa)高压下蒸汽灭菌20min，于室温保存。

　　34.配制：

　　乙二胺四乙酸二钠盐滴定液(0.1mol/L)

　　称取乙二胺四乙酸二钠盐40g，加热溶于1000ml水中，冷却，摇匀。

　　乙二胺四乙酸二钠盐滴定液(0.05mol/L)

　　称取乙二胺四乙酸二钠盐20g，加热溶于1000ml水中，冷却，摇匀。

　　乙二胺四乙酸二钠盐滴定液(0.02mol/L)

　　称取乙二胺四乙酸二钠盐8g，加热溶于1000ml水中，冷却，摇匀。标定：

　　标定：

　　0.1mol/L乙二胺四乙酸二钠盐溶液，取于约800℃灼烧至恒重的基准氧化锌0.25g±0.0001g，用少量水湿润，加2ml稀盐酸20%使其溶解，加水100ml，用10%氨水调至PH=7～8，加10ml氨—氯化铵(pH=10)及铬黑T指示剂，用配制好的乙二胺四乙酸二钠滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液由紫色变为纯蓝色。同时做空白。

　　C(EDTA)——乙二胺四乙酸二钠盐标准溶液量浓度 mol/L

　　V1——乙二胺四乙酸二钠盐标准溶液用量 ml

　　V2——乙二胺四乙酸二钠盐标准溶液用量 ml

　　0.08138——与1.00ml乙二胺四乙酸二钠盐标准溶液1.000mol/L相当的以克表示的氧化锌的质量

　　附：其他常用溶液的配制

　　1.0.5mol/l EDTA(pH8.0)溶液

　　【配制方法】在800ml水中加入186.1g二水乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na?2H2O)，在磁力搅拌器上剧烈搅拌，用NaOH调节　溶液的pH值至8.0(约需20g NaOH颗粒)然后定容至1L，分装后高压灭菌备用。

　　【注意】EDTA二钠盐需加入NaOH将溶液的pH值调至接近8.0，才能完全溶解。

　　0. 1mol/l EDTA(pH8.0)溶液

　　【配制方法】在800ml水中加入37.224g二水乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na?2H2O)，在磁力搅拌器上剧烈搅拌，用2当量NaOH调节　溶液的pH值至8.0然后定容至1L。

　　使用时稀释一百倍变成1mMol/l EDTA工作液。PH值调至8

　　2.磷酸盐缓冲溶液(PBS)溶液

　　【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,用HCl调节　溶液的pH值至7.4加水定容至1L，在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌20min。保存于室温。

　　3.Tris缓冲盐溶液(TBS)(25mmol/l Tris)

　　【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解8g NaCl、0.2g KCl和3g Tris碱，加入0.015g酚并用HCl调至pH值至7.4，用蒸馏水定容至1L，分装后在151bf/in2(1.034×105Pa)高压下蒸汽灭菌20min，于室温保存。

　　Tris缓冲盐溶液(TBS)(50mmol/l Tris PH7.6)

　　Tris缓冲盐溶液(TBS)(50mmol/l Tris)

　　【配制方法】称取Tris(三羟甲基氨基甲烷)6.057g，加少许双蒸水溶解后加1HCL42ml,Nacl 8.5g,最后加双蒸水至1000ml,用1N HCL或NAOH调至7.6,充分摇匀,4℃保存。