高效液相色谱仪检测大豆黄卷含量介绍

实验与分析 0 2020-09-09

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本品为豆科植物大豆Glycine max(L.)Merr.的成熟种子发芽干燥而得.大豆用水浸泡至膨胀,将水放出,用湿布覆盖,每日用清水冲洗一次或喷淋二次,待芽长至0.5cm～1cm时,取出,干燥.

　　本品为豆科植物大豆Glycine max(L.)Merr.的成熟种子发芽干燥而得。大豆用水浸泡至膨胀，将水放出，用湿布覆盖，每日用清水冲洗一次或喷淋二次，待芽长至0.5cm～1cm时，取出，干燥。

　　【性状】本品略呈肾形，长约8mm，宽约6mm。表面黄色或黄棕色，微皱缩，一侧有明显的脐点，一端有1弯曲胚根。外皮质脆，多破裂或脱落。子叶2片，黄色。气微，味淡，嚼之有豆腥味。以粒大、饱满者为佳。

　　【鉴别】 (1)取本品粉末1g，加稀乙醇30ml，超声处理30分钟，离心(3000转/分钟)10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加稀乙醇1ml使溶解，取上清液，作为供试品溶液。另取亮氨酸对照品，加稀乙醇制成每1ml 含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录Ⅵ B)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水(19：5：5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

　　(2)取本品粉末2g，加80%乙醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加80%乙醇1ml使溶解，取上清液，作为供试品溶液。另取染料木苷对照品，加80%乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录Ⅵ B)试验，吸取供试品溶液5～10μl、对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-水(10：1.7：1.3)为展开剂，展开缸中预饱和30分钟，展开，取出，晾干，喷以2%三氯化铝乙醇溶液，在105℃加热数分钟，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

　　【检查】水分不得过11.0%(附录Ⅸ H)。

　　总灰分不得过7.0%(附录Ⅸ K)

　　【含量测定】照高效液相色谱法(附录Ⅵ D)测定。

　　色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇为流动相A，以1%醋酸溶液为流动相B，按下表进行梯度洗脱;柱温35℃;检测波长为260nm。理论板数按大豆苷、染料木苷峰计算均不得低于5000。

　　时间(分钟) A(%) B(%)

　　0～25

　　25～33 28

　　28→45 72

　　72→55

　　对照品溶液的制备取大豆苷、染料木苷对照品各约10mg，精密称定，置50ml量瓶中，加70%甲醇至刻度，摇匀;精密量取1ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。

　　供试品溶液的制备取本品粉末(过四号筛)约1.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇25ml，称定重量，加热回流2小时，放冷，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，离心(2000转/分钟)10分钟，取上清液，滤过，取续滤液，即得。

　　测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10µl，注入液相色谱仪，测定，即得。

　　本品按干燥品计算，含大豆苷(C21H20O9)和染料木苷(C21H20O10)的总量不得少于0.08%。

　　【炮制】取灯心草、淡竹叶置锅内，加入适量水煎煮二次，第一次60分钟，第二次30分钟，合并煎液，滤过。滤液与大豆黄卷共置锅内，煮至药液被吸尽，取出，干燥。

　　每100kg净药材用灯心草1kg、淡竹叶2kg。

　　Syltech500型高效液相色谱仪(单泵配置/梯度)

　　1 泵 P501型恒流高压输液泵

　　1.1 液体输送原理：双柱塞串联往复方式，自动脉冲抑制系统，另配有溶剂压缩因子程序，能自动补偿流量，液体输送更精准

　　1.2 最大输送压力：大于等于6000PSI(约42MPa以上)

　　1.3 流速精度：0.1%

　　1.4 流速范围：(0.001-10.000)mL/min最小增量0.001mL/min

　　1.5 柱塞杆清洗：不需另配设备即可自动柱塞杆清洗，保护柱塞杆

　　1.6 安全性：配有开机自检，高低压报警和保护功能

　　1.7 梯度系统：二元梯度混合系统/单泵系统

　　1.7.1 混合范围：0到100%

　　1.7.2 混合原理：高压混合

　　1.7.3 混合液体数:大于等于2元

　　1.7.4 脱气装置：内外置脱气均可

　　2 紫外检测器UV501型紫外可变波长检测器

　　2.1 光源：氘灯(钨灯可选)氘灯寿命2000个小时，保证使用寿命1000小时以上

　　2.2 波长范围：190到720nm(步增1nm)

　　2.3 波长准确度：<±1nm

　　2.4 波长重现性：<±0.5nm

　　2.5 带宽：小于5nm

　　2.6 噪音：<±2.5*10-5AU(特定条件下)

　　2.7 漂移：<±2.5*10-4AU(特定条件下)

　　2.8 流通池体积：10ul体积、光程10mm

　　2.9 吸收量程：0.01AU/V-10AU/V(共十档)进样信号控制(事件)，自动调零

　　2.10 功能：具有定点波长测量，数据处理硬件嵌入检测器，数字信号直接采集处理功能

　　3 色谱柱：VertexTMXB-C18 4.6*250mm*5um 液相色谱柱、配保护柱

　　4 柱温箱：室温上10度到100度(0.1度增量)

　　5 N2010药典版色谱工作站：色谱工作站(满足2010版药典要求，美国制作)中英文操作软件，支持WIN9X/XP/2000/2003等操作系统，硬件嵌入检测器，数字信号直接采集处理

　　6 Vertex7825i手动进样阀：Vertex7825i手动进样阀(带远程触发开关)，自带20UL定量，耐压8000psi,进样次数超1万次以上

内容来源：互联网

责任编辑：展源

审　　核：何发

高效液相色谱仪检测大豆黄卷含量介绍

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