一文为你揭秘六通阀是如何工作的~

展源 0 2023-06-26

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六通阀进样器是高效液相色谱系统中最理想的进样器，了解和掌握六通阀的工作原理有利于对它的使用和维护，延长其使用寿命。然而很多实验操作人员对六通阀的工作原理模棱两可，缺乏准确的认识，今天就给大家带来详细的六通阀进样器工作原理图文介绍。

六通阀进样器是由圆形密封垫（转子）和固定底座（定子）组成。当在充样（Load）位置时，从进样孔充样进定量环，多余样品从放空孔排出；转动至进样（Inject）位置时（将六通阀转子转动60°），由泵输送的流动相冲洗定量环，推动样品入柱。六通阀进样器最为通用，各大HPLC仪器制造商均以此产品作为仪器的进样器。

液相色谱六通阀工作原理

六通阀进样器的工作原理主要分为两步，分别是上样和进样，如下图所示。其中，红色虚线表示定量环。首先，使用泵将流动相从1号压入，通过2号进入色谱柱中，使之在色谱系统中形成稳定的流路；然后样品经进针口从3号注射进定量环中，定量环中充满后，多余的样品液从5号放空孔排出，此时进样完成。

待样品进入定量环后，1号阀与6号阀接通，2号阀和3号阀接通，由泵输入的流动相冲洗定量环，将待测样品冲入色谱柱中进行分离检测。

图1 六通阀工作原理

下面的图示更直观地介绍了六通阀进样器的工作原理。

流动相与色谱柱构成封闭环路，样品从进样口注入，进入定量环中，多余的以废液形式排出。

待样品完全进入后，六通阀改变阀之间的连接方式，将流动相入口与定量环接通。

流动相通过定量环，将待测样品冲入色谱柱中。

再次改变六通阀的连接方式，重新连回初始状态，通过流动相的洗脱对待测样品进行分离检测。

与高效液相色谱六通阀原理相似，可以简单地介绍一下。

气相色谱六通阀工作原理

外部六个接口由中间的某部件两两联通，关闭时是左边这样，打开时中间联通的部件转动60°，变成右边这样。

然后再说外部的连接。平时的整个气路系统（进气部分气路也可能是进样口，用微量进样器打进去。另外这里说的是气相色谱，液相可能略有不同。）是下面这个样子。其中两个分别连进样口和尾气，两个连色谱柱，剩下的两个互相连起来，中间定量环这段管中的样品就是用来进样的。

红色是你的样品，直接从进样口进去然后就吹出去了。蓝色是色谱柱里面的载气。然后你点了一下进样，咔嚓，六通阀一开，整个系统马上变成下面这样：

定量环改成连接在了色谱柱的两端，于是载气将中间残留的一段样品带入色谱柱。

虽然六通阀进样器具有结构简单、使用方便、寿命长、日常无需维修等特点，但正确的使用和维护将能增加使用寿命，保护周边设备，同时增加分析准确度。如使用得当的话，六通阀进样器一般可连续进样3万次而无需维修，以下浅谈有关六通阀进样器的使用及保养事宜：

1、如果扳阀处于Load和Inject之间，便阻死了液流，压力骤增，再转到进样位，过高的压力在柱头上引起损坏，所以应尽快转动阀，不能停留在中途。在HPLC系统中使用的注射器针头有别于气相色谱，是平头注射器。一方面，针头外侧紧贴进样器密封管内侧，密封性能好，不漏液，不引入空气；另一方面，也防止了针头刺坏密封组件及定子。

2、六通阀进样器的进样方式有部分装液法和完全装液法两种。使用部分装液法进样时，进样量最多为定量环体积的75％，如20μl的定量环最多进样15μl的样品，并且要求每次进样体积准确、相同；使用完全装液法进样时，进样量最少为定量环体积的3至5倍，即20μl的定量环最少进样60至100μl的样品，这样才能完全置换样品定量环内残留的溶液，达到所要求的精密度及重现性。推荐采用100μl的平头进样针配合20μl满环进样。

3、可根据进样体积的需要自已制作定量环，一般不要求精确计算定量环的体积。譬如，一根名义上10μl的定量环，实际是9μl还是10μl并不重要，因为被测样品和校正样品的进样体积保持一致，在计算结果时误差都被抵消了。

4、进样样品要求无微粒和能阻死针头及进样阀的物质，样品溶液均要用0.45μm的滤膜过滤。防止微粒阻塞进样阀和减少对进样阀的磨损。为防止缓冲盐和其它残留物质留在进样系统中，每次结束后应冲洗进样器，通常用不含盐的稀释剂、水或不含盐的流动相冲洗，在进样阀的Load和Inject位置反复冲洗，再用无纤维纸擦净注射器针头的外侧。

内容来源：药物分析学社

责任编辑：展源

审　　核：何发

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