【操作技巧】血平板制作注意事项

展源 0 2023-09-12

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血平板制作

【操作技巧】血平板制作注意事项

血平板培养基

血琼脂平板培养基

血琼脂平板培养基，主要用于链球菌及其他苛养菌（对生长环境、营养要求较苛刻的细菌）的分离、培养或用于细菌溶血现象的观察（如金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特氏菌等）。

1.成分

其中的蛋白胨和牛肉粉主要提供细菌生长所需要的碳源、氮源、氨基酸及维生素。氯化钠维持培养基中的渗透压，琼脂用做凝固剂。脱纤维羊血一方面提供一些特殊的生长因子，另一方面用于观察溶血反应。

2.制法

根据要求选择取不同的学琼脂平板基础，如营养琼脂、豆粉琼脂或哥伦比亚琼脂（用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验）等，加蒸馏水溶解后，高压灭菌。冷却至50~55℃，加入一定量的羊血，缓慢混匀后倾注平板。注意一定要冷却后再加入羊血，否则红细胞有可能会破碎。

3.制备光洁平整不产气泡的血平板技巧

自制的血平板有时会出现气泡，坑洼凹凸不平的现象，如图所示。

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原因分析：

很有可能是倾注培养基时培养基带有气泡，倾注平板，凝固后所致。

解决步骤：

（1）培养基灭菌后置水浴50-55℃保温。

（2）血液一般冷藏。提前取出血液放置在室温下，自然升温至室温。

（3）向培养基中添加血液。移液管吸取血液后加入培养基时，缓慢放液，同时缓慢摇动三角瓶使相互混匀。

（4）倾注培养基后，找平稳地方（越水平越好）冷却。

（5）收皿叠放保存。

错误操作：

（1）培养基灭菌后高温直接加血倾注，皿盖水汽很多，造成后续影响。

（2）血液如果直接从冰箱里拿出来就马上加入培养基，由于温差较大，加入后很容易形成片状凝固。

（3）放液太快容易形成片状凝固。摇动太剧烈会形成气泡，培养基粘度大气泡形成后很难消除。

（4）如果不是平面，液体保持水平，而皿是斜的，最后造成培养基在某一直径上形成一边高一边低的现象。

（5）不可急着收皿或急脾气急着查看皿凝固了没有。有时候看似凝固了，只是表面，倒过来或移动后以会造成培养基坍塌或坑洼不平。

内容来源：食品微生物检测

责任编辑：展源

审　　核：何发