你是否真正了解我--峰纯度

张明 0 2023-12-27

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峰纯度

分离分析的一个基本要求是能够验证分离物质的纯度，也就是说，确保没有共洗脱的杂质对目标峰响应值得干扰。

峰纯度的确认应在定量之前完成。忽视峰纯度确认意味着在质量控制中，一个杂质隐藏在目标峰下可以造成结果失真，或者在研发过程中重要信息可能丢失。在分析方法验证项目（专属性、线性、定量限、检测限、精密度、耐用性）中峰纯度也是需要同时检查的。

接下来我们来看色谱分析两大仪器品牌不同峰纯度的确定方法吧。

Waters

整个峰的纯度由纯度角和阈值角决定。

峰纯度 ：纯度测试将校正峰顶点处的光谱波形和整个峰的光谱波形，并进行比较。如果峰中间的光谱形状不同，首先应考虑可能与峰光谱波形不同的其它组分与之共洗脱。

纯度角 ：光谱一致性的一种衡量方法，即将积分峰上每个数据点的光谱与峰顶点光谱进行对照，计算出峰各处的光谱与峰顶点光谱之间的夹角的加权平均值。整个峰的纯度可以通过该值确定。纯度角的范围是从0 ~90度。值小（特别在小于阈值时）表明光谱均匀。值大表明不均匀程度较大

注意事项

1、如果观察到高纯度标准品的纯度不佳，可能是由以下几个主要原因造成的：

A 浓度过高

即使只在部分波长下的吸光度超过1AU，也会破坏吸光度线性，导致光谱出现畸变，得到较差的纯度。请降低浓度，确保最大吸收波长处的吸光度不超过1AU，然后再次进行测量。

B 流动相的背景吸光度高

如果在低波长下流动相的背景吸光度比较大，则该波长下吸光度的线性范围较小，测得的光谱会发生畸变。在这种情况下，请在处理方法的“纯度”选项卡上缩小要计算的波长范围，然后重新处理。或者避开背景吸光度较大的波长，然后重新测量。

2、光谱差异显著的组分应同时洗脱。

检测不到共洗脱的主要原因是光谱相似、含量极少的组分共洗脱，但即使共洗脱组分的光谱差异很大，也可能无法被检测到。那就是共洗脱组分均匀地与主要组分峰重叠的情况。在这种情况下，以相同比率共洗脱的组分在峰基线和峰顶点处与主要组分重叠，而峰基线和峰顶点是判定峰的标准。简而言之，各谱图的波形与两个波形的总和相同，且比率相同。纯度测试无法检测到这种情况。

Agilent

1、将不同波长下采集的色谱图进行对比去寻找不一致的色谱峰。良好的重叠，其中峰形、保留、保留时间匹配，则表示纯峰；而较差的重叠表示不纯峰，如图 1 所示。