HPLC使用过程中问题汇总

张明 0 2024-09-18

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高效液相色谱法是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。但是作为一个相对复杂的仪器，在使用过程中你是不是遇到了关于HPLC的各种恼人的问题？以下内容或许能帮到您。

故障	现象	可能原因		解决方法
压力异常	无压力显示无流动相流动	无法开机		1.电源问题：检测相应的电源配置； 2.未开机，打开电源； 3.保险丝被烧坏，更换保险丝；
		泵未启动		1.设置合适的泵的流量； 2.溶剂管理器中，设置充足的的溶剂余量；
		工作站未正常连接	仪器指示灯常亮	1.网线/USB线异常，更换网线/USB线； 2.工作站端口未设置，设置工作站端口；网线：192.168.1.10； USB线：192.168.8.10； 3.电脑IP与工作站IP冲突，修改电脑IP为192.168.1.11
			仪器状态灯闪烁	1.CAN线连接异常，重新插拔一下CAN线； 2.通讯板灯异常：备注1更换通讯板；
		柱塞杆折断		更换柱塞杆；
		泵头内有空气		1.溶剂脱气； 2.打开旁路放空阀，5mL/min高流量放空；
		流动相不足		补充流动相
		过滤沉子堵塞		更换过滤沉子
		单向阀损坏		更换单向阀
		漏液		拧紧或更换相应漏液部件。
	流动相流动正常但没有压力显示	旁路放空阀组件损坏		更换旁路放空阀组件
	压力持续偏高/ 不断升高	保护柱阻塞		清洗或更换保护柱
		流速设定过高		调整流速设定
		柱前筛板堵塞		1.在允许情况下反冲色谱柱； 2.更换筛板； 3.更换色谱柱；
		流动相使用不当或缓冲盐的结晶沉淀		1.使用恰当的流动相； 2.冲洗色谱柱；
		色谱柱选择不当		选择恰当的色谱柱；
		进样阀损坏		清洗或更换进样阀；
		柱温过低		提高温度；
		工作站失常		1.工作站问题。更换工作站； 2.电脑版本和工作站冲突，更换推荐配置的电脑；
		在线过滤器阻塞		清洗或更换在线过滤器；
	压力持续偏低/ 不断下降	系统漏液		确定漏液位置并维修；
		流速设定过低		调整流速；
		色谱柱选择不当		选择恰当的色谱柱；
		柱温过高		降低温度；
		控制器失常		维修或更换控制器；
		工作站失常		1.工作站问题。更换工作站； 2.电脑版本和工作站冲突，更换推荐配置的电脑；
	压力波动	泵中有气体		1.溶剂脱气； 2.除去泵中气体；
		单向阀损坏		更换单向阀；
		泵密封损坏		更换密封圈；
		脱气不充分		1.溶剂脱气；
				2.改变脱气方法（使用在线脱气法等）；
		系统漏液		确定漏液位置并维修；
		使用梯度洗脱		由于流动相粘度的变化引起的压力波动；
漏液	接头处漏液	接头松动		拧紧；
		接头磨损		更换；
		接头过紧		1.拧松，再重新拧紧； 2.更换；
		接头被污染		1.拆下清洗； 2.更换；
		接头处连接管未正常连接		1.拧松接头，先将连接管固定或压到底，再拧紧接头； 2.韧环或连接管发生不可恢复的变形引起的漏液，更换韧环或连接管路；
		部件不匹配		使用同一品牌的配件；
	泵漏液	单向阀松动		1.拧紧单向阀（不必拧的过紧）； 2.更换单向阀；
		接头松动		拧紧接头（不必拧的过紧）；
		泵密封损坏		维修或更换泵密封圈；
		旁路放空阀组件损坏		1.拧紧旁路放空阀； 2.维修或更换旁路放空阀组件；
		比例阀损坏		1.检查隔膜，如果漏液立即更换； 2.检查手紧接头，损坏的立即更换；
	检测器漏液	流通池垫片损坏		1.避免过大的背景压力（压力降）； 2.更换垫片；
		流通池窗破碎		更换窗口；
		手紧接头漏液		拧紧或更换；
		废液管阻塞		更换废液管；
		流通池阻塞		重新安装或更换；

备注1：当仪器的CAN线都已经正常连接，且仪器处于打开状态，通讯板上的指示灯处于闪烁的状态。若通讯板上的指示灯不亮或常亮，为通讯板异常。通讯板的指示灯不亮，可能是通讯板未接通电源。检查仪器是否开机，CAN线是否有松动情况。若通讯板常亮，为通讯板异常，更换通讯板。

备注2：若输液泵中存在大量的气泡或新仪器安装时，使流动相充满溶剂瓶到输液泵的管路，并检查泵上各个接头处，确保仪器未漏液。然后将旁路放空阀上接到进样器的管路卸下，用堵头堵住。打开旁路放空阀，5mL/min的流量冲洗并隔个1min左右，将旁路防空阀旋紧2～3s观察工作站中的压力显示，压力不得超过25MPa，然后迅速旋松，不断循环此操作5min。将旁路放空阀到进样器的管路连接好，观察输液泵是否正常吸液或压力波动是否好转，若现象有好转，但仍然压力波动较大，则重复此操作至压力平稳。