高压蒸汽灭菌器的操作也比较简单，各个品牌的基本操作都大同小异，根据每个机器的功能不同可能会有稍许的差异。今天小析姐就为您分享一篇高压灭菌锅的操作标准程序。

一、实验室操作标准程序

（一） 目的

建立高压灭菌锅操作以及维护保养的标准程序，规范操作人员的操作，从而确保人员的安全及设备的正常运行。

（二） 范围

适用于本所高压蒸汽灭菌器灭菌效果的验证。

（三） 职责

3.1 质量负责人批准该验证程序。 

3.2 质量监督员负责监督该程序的实施。

3.3 检验人员负责该程序的实施，并做好相关记录。

（四） 程序

4.1 检验人员按该程序实施验证，做好记录，做出结果评价，上报质量负责人。

4.2 以上验证结果经质量负责人批准，以后高压蒸汽灭菌器按验证的方法操作。

（五） 使用步骤

A.准备

在将灭菌器械放入前，请您先将需要灭菌的器械清洗干净，以避免灭菌器上残留的物质对灭菌器本身以及灭菌器械产生危害。

1、使用后应及时清洗灭菌的器械，清洗灭菌器械上附着的残留物。推荐使用清洗机、净化剂和蒸馏水清洗灭菌器械。

2、清洗后,建议再用清水冲洗一遍，以确保其清洁。

3、在把器械放入灭菌提蓝时，请先将不同类别的器械分别放置，例如不锈钢、碳钢等，并且器械之间应留有适当的间隙。如果需要灭菌碳钢器械，在放置前，在提篮上应当垫上若干层消毒纸或木棉纸，避免碳钢和不锈钢直接接触。

4、试管、玻璃瓶等的灭菌应使开口向下竖直放置，以便于置换冷空气和饱和蒸汽的进入。

5、在每个提篮内放置一个灭菌指示卡。

6、每月一次，在负载中放置生物孢子检测指示剂，检测灭菌效果。

7、提篮不允许超载（12kg）,否则将会引起不充分的灭菌和干燥。

8、灭菌时需包裹的器械应选用透气性好的包装材料，例如灭菌袋、灭菌纸、薄纱织物等。

9、试管玻璃瓶等的灭菌，应使开口向下竖直放置，以便于空气的排出和蒸汽的进入。

如果是橡胶管灭菌准备工作：

请先用温水清洗橡胶管，然后将其放置在清洁的灭菌托盘上，同时确保管子的两头开口的空心管道，无任何急拐弯、扭曲、扭结等。

敷料包灭菌前的准备工作：

把敷料包垂直放在托盘上，避免与灭菌器内壁接触。

培养基灭菌前的准备工作：

仅限用耐热玻璃瓶，装载量不超过1/2容积，容器封口应使用透气性瓶塞。

B.升温

按启动键，灭菌器进入升温行程。

2.1 升温指示灯亮（注意：必须高水位灯亮时才能进行加热）

2.2 上排数码管显示内室温度，下排数码管显示排冷气温度。

2.3 电热管通电，内室开始升温。同时冷空气通过排冷气温度。

2.4 当内室温度到达设定的置换温度（即设置好的排冷气温度）时，排汽阀关闭，电热管继续加热。上排数码管显示内室温度，下排数码管显示灭菌时间的数值。

C.灭菌

当内室温度到达设定的灭菌温度时，开始灭菌计时，计时以秒为单位递减。

D.结束

当灭菌时间递减为0，转入结束。内室开始排汽，温度下降，当内室温度降至说明书上温度，蜂鸣器鸣叫代表灭菌结束。压力表指针回复“0”；

（六）效果验证

高压蒸气灭菌器使物品灭菌后达到无菌要求，这是药品实验中的基本保证。高压灭菌器灭菌效果是否合格足实验成败的最基础最关键的首要步骤。除少数培养基只需加热溶解，不需高压灭菌外，大部分培养基均需121℃高压灭菌15-30分钟。尤其是对无菌试验培养基灭菌不彻底，直接关系到对药品的无菌试验结果。因此必须认真对高压灭菌器进行灭菌效果的验证。为此我们提供了进行灭菌效果验证的一个简易可行的方法。

5.1 试验材料

5.1.1 嗜热脂肪芽胞杆菌纸片。

嗜热脂肪芽胞杆菌

(Bacillus stearothermophilus)ATCC7053是本法常用的生物指示菌，含芽胞量5-105CFU/片。

5.1.2 121℃压力蒸气灭菌化学指示卡。

5.1.3 溴甲酚紫胨水培养基116℃高压灭菌20分钟后备用。

5.1.4 0-150℃留点温度计。

5.2 方法与结果

将嗜热脂肪芽胞杆菌纸片（以下简称菌片）用无菌镊子放人密封试管中。化学指示卡和留点温度计放入敞口试管中。以上两种试管各准备5-10份。分别放置在高压灭菌器蒸气口处、底部排气口处及底部出水口处或上下左右中间5处。如灭菌器为二层，则需放10处。

留点温度计标化合格后方可用于验证试验。检测前，需将温度计的水银柱甩至40℃以下。每次监测后留点温度计的温差应存1℃之间，则说明灭菌器内的温度分布是均匀的。

灭菌后的菌片应在严格无菌操作条件下放入灭菌后的溴甲酚紫胨水培养基内56-60℃培养24-48小时，观察颜色变化。如培养基变为黄色，说明菌片中的嗜热脂肪芽胞杆菌尚未完全灭活，细菌仍可在培养基中生长，分解葡萄糖产酸变为黄色。如培养基颜色不变化仍为紫色，则说明芽胞已灭活。同时要用未经灭菌的纸片放入培养基内作为阳性对照，不加纸片的空白培养基作为阴性对照。

化学指示卡上的指示色块，在高压蒸气灭菌时，由淡黄色变为黑色。随着颜色变化的深浅，并与对照色相比，可判断灭菌效果是否达到要求。化学指示卡应在干燥处保存。遇潮会变色，影响灭菌效果的观测。

高压蒸气灭菌必须使蒸气顺利进入灭菌器内，与灭菌物品接触，并将原有的冷空气排出方可达到灭菌的效果。要进行空载热分布和满载热穿透力验证(满载时不超过总体积的2/3)。二种验证各重复三次，共做六次。

5个点六次试验表明温度均在121℃，化学指示卡变黑；程度与对照色一致；培养基均未改变颜色，说明高压蒸气灭菌效果合格。

5.3 验证结果与评定

验证结束后，验证人员依据试验结果对本次验证做出评价和结论，并拟定高压蒸汽灭菌器的操作规程和灭菌验证频次，上报质量负责人。

5.4 质量记录

《高压蒸汽灭菌效果验证记录》      

二、日常定期维护保养

对高压灭菌锅需进行日常定期维护保养。对于密封圈等易老化的零部件，应经常检查，如有损坏及时更换。

三、高压灭菌锅操作注意事项

使用高压蒸气灭菌器时，首先应注意在开放蒸气的同时，排除灭菌器内的冷空气。必须将器内冷空气全部排除后，才可关闭排气孔。假如灭菌器内仍存留有部分空气时，刚压力表上虽已达到了某一压力值，但器内之温度仍未达到相应之度数。存留的空气越多，刚二者相差也越大。差也越大，器内温度不足，灭菌则不彻底。