福州大学生物科学与工程学院、福州大学至诚学院的张弛、郭静科、刘树滔*
等通过选取以黑米、红米、小米、糙米等谷物为原料的粗粮自热米饭产品,通过粗粮速食米(IR/CG)替代高脂饮食(HFD),探究饮食结构改变对T2DM糖脂代谢的改善作用,以期为采用食疗方式缓解T2DM提供参考,并为开发粗粮米类功能性食品提供实验依据。
如图1A所示,在喂食28 d后,与Control组相比,T2DM小鼠体质量明显下降,与Model组相比,IR/CG组小鼠体质量明显下降。如图1B所示,与 Control 组相比,其余小鼠日均摄食量显著增加,与Model组相比,摄入含有IR/CG的各组小鼠日均摄食量显著降低,以上结果表明,T2DM小鼠存在多食现象,而IR/CG替代HFD具有改善其摄食量的作用。
由表2可知,与Control组相比,Model组小鼠肝脏、脾脏系数显著上升,与Model组小鼠相比,IR/CG-H、IR/CG组小鼠肝脏、脾脏系数显著降低,IR/CG-L、IR/CG-M组脏器系数无显著下降。结果表明摄入大量IR/CG的饮食结构能够抑制T2DM小鼠肝脏肥大和脾脏肿大。
如图2所示,在粗粮饮食干预期间,Model组小鼠空腹血糖浓度始终维持在较高水平,与Control组相比,除IR/CG组外,其余各组小鼠空腹血糖浓度明显升高;与Model组相比,摄入IR/CG的小鼠空腹血糖浓度下降,当实验结束时,IR/CG-H、IR/CG组小鼠空腹血糖浓度明显下降。以上结果表明,IR/CG替代HFD能使T2DM小鼠空腹血糖浓度得到改善,其中IR/CG-H、IR/CR改善效果明显。
由图3A可知,0 min时,Model、IR/CG-L、IR/CG-M、IR/CG-H组小鼠空腹血糖浓度高于Control组,15 min时,Control及IR/CG组小鼠血糖浓度达到峰值,其余各组小鼠血糖浓度在30 min达到最高,与Model组相比,IR/CG-H、IR/CG组小鼠血糖浓度显著降低。由图3B可知,IR/CG-H、IR/CG组小鼠血糖曲线下面积显著低于Model组,且IR/CG组小鼠与Control组小鼠无显著差异,表明摄入大量IR/CG的饮食结构能够改善T2DM小鼠的葡萄糖耐受性。
由表3可知,与Control组相比,Model组小鼠胰岛素浓度、胰岛素抵抗指数显著提高;与Model组小鼠相比,经过饮食干预的IR/CG-L、IR/CG-M、IR/CG-H、IR/CG组胰岛素水平及胰岛素抵抗指数显著下降。此外,与Control组相比,Model、IR/CG-L、IR/CG-M组小鼠胰岛素敏感指数显著下降;与Model组相比,IR/CG-H、IR/CG组小鼠胰岛素敏感指数显著提高。表明摄入含有IR/CG的饮食结构能够减轻T2DM小鼠胰岛素抵抗现象,改善高胰岛素血症。
如图4所示,与Control组相比,Model组胰高血糖素及HbA1c水平显著上升;经过粗粮饮食干预后,与Model组相比,IR/CG-L、IR/CG-M、IRCG-H及IR-CG组小鼠胰高血糖素及HbA1c水平显著降低。与Control组相比,Model组小鼠胰高血糖素样肽-1及脂联素水平显著降低;与Control组相比,Model组小鼠胰高血糖素样肽-1及脂联素水平显著降低(P<0.05);与Model组小鼠相比,摄入IR/CG的各组小鼠胰高血糖素样肽-1及脂联素水平显著上升(P<0.05),以上结果表明,IR/CG替代HFD能够降低胰高血糖素水平,缓解因高胰高血糖素促胰岛素分泌现象,通过改善胰岛素抵抗调节小鼠体内空腹血糖水平,改善T2DM小鼠的高血糖状态。
由表4可知,与Control组相比,Model组小鼠TG、T-CHO、LDL-C浓度显著增加;与Model组相比,经过饮食干预的IR/CG-M、IR/CG-H、IR/CG组小鼠TG、T-CHO、LDL-C浓度显著下降,而IR/CG-L组小鼠TG浓度显著降低,但其T-CHO、LDL-C浓度无显著变化,此外,各组小鼠HDL-C浓度无显著变化。表明IR/CG替代HFD能够调节T2DM小鼠血脂水平。
如图5所示,与Control组相比,Model组小鼠血清及肝脏IL-1β、IL-6、TNF-α水平显著上升;与Model组相比,IR/CG干预后的IR/CG-M、IR/CG-H、IR/CG组小鼠血清及肝脏IL-1β、IL-6、TNF-α水平显著下降,IR/CG-L组小鼠的血清IL-1β、IL-6及肝脏TNF-α水平显著下降,但其血清TNF-α及肝脏IL-1β、IL-6水平无显著变化小鼠促炎细胞因子测定结果表明,IR/CG替代HFD能够减轻T2DM小鼠炎症水平,进而缓解T2DM。
如图6A所示,Control组肝细胞轮廓清晰且细胞以中央静脉为中心呈放射状分布,排列整齐,细胞周围有脂肪滴形成,但尚未挤压细胞且无明显炎性细胞浸润。而T2DM小鼠肝内出现明显的脂肪滴,其中Model组小鼠肝细胞数量明显减少,出现大量脂肪滴,脂肪空泡体积大并将细胞核挤压至边缘,同时肝细胞出现肿大,发生气球状病变。与Model组相比,IR/CG-L、IR/CG-M、IR/CG-H、IR/CG组小鼠脂肪空泡体积减小、数量减少,说明肝脏脂肪变性经过IR/CG干预后被抑制。
如图6B所示,Control组小鼠的胰岛细胞数量多,排列整齐且胰岛结构完整,胰岛呈椭圆状。而T2DM小鼠胰岛结构出现不同程度的萎缩,面积变小,形态不规则、不呈椭圆状,此外胰岛细胞数量明显减少且排列散乱。IR/CG-L、IR/CG-M两组小鼠采用低中IR/CG摄入量进行干预,发现两组小鼠胰岛细胞排列紊乱,胰岛不规则且面积较小。而在摄入高剂量IR/CG以及IR/CG干预后,可以发现IR/CG-H组小鼠胰岛面积增大,胰岛细胞数量增加,结构有成椭圆状迹象但仍不规则,而IR/CG组小鼠胰岛细胞明显增加,细胞排列较紧密整齐,胰岛面积增大,部分结构规则,呈椭圆状,以上结果表明大量摄入IR/CG能够在一定程度上修复胰岛,改善胰岛素分泌异常造成的损伤。
高脂饲料中添加了猪油,含有饱和脂肪酸,且和IR/CG相比,脂肪含量较高。因此,本实验通过HFD联合STZ诱导小鼠产生T2DM,通过4 周的饮食干预探究IR/CG干预HFD对T2DM小鼠的影响。
经研究发现,与HFD相比,低脂肪含量的IR/CG的饮食结构能够缓解HFD/STZ诱导的T2DM小鼠高胰岛素血症,降低小鼠胰高血糖素、HbA1c水平,减轻T2DM小鼠炎症从而减轻胰岛素抵抗达到降低血糖的作用,并显著改善血脂水平。此外,IR/CG替代HFD能减少肝脂肪变性,部分恢复胰岛,使胰岛细胞增加。
值得注意的是,摄入IR/CG类食品能够使肠道菌群中拟杆菌、普雷沃氏菌等有益菌丰度增加,且这些有益菌与FBG、TG、T-CHO、LDL-C以及促炎细胞因子水平显著负相关,普雷沃氏菌可以增强支链氨基酸水平,产生丁酸盐,改善胰岛素抵抗,而拟杆菌属能够将复杂的多糖转化为对人类有益的化合物,可以分解难消化的膳食多糖,还能够产生乙酸,通过多种途径调节糖脂代谢,减轻T2DM症状。由此推测IR/CG替代HFD改善糖脂代谢、胰岛素抵抗状态可能与改善小鼠肠道菌群有关。
本研究中,IR/CG替代HFD能够改善T2DM小鼠血糖血脂水平,研究结果可为通过少油脂多粗粮的饮食结构缓解T2DM提供参考,并为开发粗粮米类功能性食品提供理论依据,但其作用机理还需进一步研究探讨。
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